操作步驟

1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

40ng/ml

5 號標準品

150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液

20ng/ml

4 號標準品

150μl 的 5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

10ng/ml

3 號標準品

150μl 的 4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

5ng/ml

2 號標準品

150μl 的 3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

2.5ng/ml

1 號標準品

150μl 的 2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

1.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、

待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，

然后再加待測樣品 10μl（樣品最終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量

不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3

1.

溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

2.

配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

3.

洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此

重復 5 次，拍干。

4.

加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。

5.

溫育：操作同 3。

6.

洗滌：操作同 5。

7.

顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯

色 10 分鐘.

8.

終止：每孔加終止液 50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

9.

測定：以空白孔調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止液

后 15 分鐘以內進行。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未

用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好

控制在 5 分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本 OD 值

大于標準品孔第一孔的 OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）后再測定，計

算時請最后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。