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牛核轉錄因子(NF-KB)ELISA試劑盒
產品簡介:

上海心語生物科技有限公司基地研發,檢測精準,高靈敏度!牛核轉錄因子(NF-KB)ELISA試劑盒生物藥物分析方法開發分析方法驗證高品質科研elisa試劑盒、化學發光試劑盒開發與定制
僅供科研使用,不得用于臨床檢驗。

產品型號:

更新時間:2025-09-29

廠商性質:生產廠家

訪問量:93

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產品介紹

產品名稱:牛核轉錄因子(NF-KB)ELISA試劑盒

產品規格48/96孔板,可拆

免費代測:檢測波長:450nm 所需樣本體積: 50-100ul

貯存方法:試劑盒未拆開,4℃保存。已拆開,標準品-20℃保存,其它4℃保存。

檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。

特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應

供應的種屬有:大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等

一、心語生物服務

 我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。

、技術流程

雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

間接法(檢測未知抗體)

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。

2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。

3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。

4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。

5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。

2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)

3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。

4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。

5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

、樣本處理方案

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。

5. 培養細胞:檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

6. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

7. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

四、客戶須知

1、液體類標本(細胞培養上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等);

2、樣本保存:請盡早檢測,2-8℃保存一天;需更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,請將樣本及時分裝標號后,置-20℃或-70℃保存;

3、請提前告訴我們:您樣本的種屬、樣本數量、待測指標及其他特殊要求。


、報告內容及標準

1、ELISA標準曲線;

2、詳細的實驗步驟;

3、完整的實驗報告(試劑耗材,實驗方法,實驗結果及結果說明);

4、實驗進行階段,我公司客服人員會及時向您匯報實驗進程。

六、牛核轉錄因子(NF-KB)ELISA試劑盒免費代測服務須知

凡購買本公司目錄任何一種檢測試劑盒,您只需將需要檢測的動物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey,Pig……)種類和檢測指標(介素類、因子類)及標本數量(48T/96T)通知公司業務員即可。在接到客戶標本當日起,現貨產品一周內將檢測報告交到客戶手中!

注意事項:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。

寄標本時需注明以下情況:

1、標本編號;

2、所測項目;

3、是否做復孔;

4、實驗后標本是否寄回。

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